厭氧培養(yǎng)箱使用說明

（一）操作室厭氧環(huán)境形成：

1.按使用要求放置好必要的附件和器具；

2.通電源開照明燈，開溫控儀，調(diào)節(jié)所需溫度；

3.操作室內(nèi)放入鈀粒（封閉）和干燥劑，并放入美蘭指示紙（封閉）；

4.關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗；

5.操作室內(nèi)氮氣置換：

A.把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊

B.接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥，使手套鼓起，關(guān)閉閥門，然后扎緊袋口；

6.操作室氮氣置換重復一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。如此連續(xù)三次氮氣置換。

7.操作室第四次置換（混合氣體置換）：

（混合氣體配比為N2 85%、H2  10%、CO2  5%）

A.調(diào)換氣路打開混合氣閥進氣，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣；

B.關(guān)掉混合氣體閥，并打開閥，使混合氣體經(jīng)過流量計，調(diào)整流量計，流量為每分鐘10ml左右；

C.混合氣體重復2-3次轉(zhuǎn)換，經(jīng)過上述過程，基本形成厭氧環(huán)境。

8.操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后打開美蘭指示紙觀察其情況，不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境；

9.開紫外線燈，室內(nèi)進行殺菌處理，時間按具體實驗自定。

（二）菌種的置入和培養(yǎng)：

1.檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊；

2.打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門；

3.取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度，然后人工打開氮氣閥進氣，使指針回復零位，關(guān)掉氮氣閥。重復操作一次。第三次操作時，然后打開混合氣體閥進混合氣，使指針回復零位，關(guān)掉混合氣體閥。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束；

4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)；

5.取樣室外門開啟、關(guān)緊，再抽低真空度檢驗；

6.厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件：

A.每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示紙觀察，如不正常就必須重新?lián)Q氣；

B.要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體，使補進的氮氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收，保證室內(nèi)厭氧狀態(tài)；

C.連續(xù)培養(yǎng)運行，更換一次除氧劑和干燥劑。

D.操作室內(nèi)溫度可任意選擇和控制。

7.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調(diào)整：調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力0.1Mpa左右。

 注意事項

1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方；

2.開機前應(yīng)熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明，掌握正確使用方法；

3.培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達到優(yōu)良厭氧環(huán)境后放入；

4.如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內(nèi)仍可保持10小時厭氧狀態(tài)（超過10小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理）；

5.經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象；

6.調(diào)換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體；真空泵按要求使用，定期檢查加油。